
Bioassays in Experimental and Preclinical Pharmacology
1.Überblick
2.Zellkultur-Assays
2. 1 Zellzyklustest: Propidiumjodid-Markierung.
2. 2 Apoptose-Assay: Annexin V/Propidiumjodid-Markierung.
2. 3 Zytotoxizität in Caco-2-Zellen mit der Alamar-Blau-Methode.
2. 4 Lebensfähigkeit in Caco-2-Zellen, stimuliert mit Lipopolysaccharid (LPS)
2. 5 Bestimmung von Stickstoffmonoxid (NO) im In-vitro-Versuch.
2. 6 Analyse der spezifischen Zytotoxizität gegen RAW 264. 7 zur Bestimmung der entzündungshemmenden Aktivität in vitro.
2. 7 Kratzen von Fibroblastenzellen (Scratch-Assay)
2. 8 Bewertung der in vitro-Entzündungsreaktion in AGS-Zellen.
3.Phytochemische Analyse
3. 1 Vorläufige phytochemische Untersuchungen.
3. 2 Quantitative Analyse der Sekundärmetaboliten.
3. 3 Dünnschichtchromatographische Analyse.
3. 4 Analyse durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC)
3. 5 Massenspektrometrie.
3. 6 Analyse mittels Elektrospray-Ionisations-Massenspektrometrie (ESI-MS).
3. 7 Identifizierung von phenolischen Verbindungen durch HPLC-LC-ESI-MS/MS.
3. 8 Quantitative Bestimmung des Gesamtalkaloidgehalts durch HPLC.
3. 9 Quantitative Bestimmung des Gesamtalkaloidgehalts mittels HPLC.
4. Präklinische Dosisberechnung von Arzneimitteln
4. 1 Umrechnung auf der Grundlage der Normierung der Dosis auf die Körperoberfläche.
4. 2 Bestimmung der Tieräquivalentdosis.
5.Toxikologische Studien (In Vitro und In Vivo)
5. 1 Bewertung der Zytotoxizität mit Alamar Blau.
5. 2 Mikronukleustest.
5. 3 Komet-Test.
5. 4 Wirkung auf den Zellzyklus.
5. 5 In vivo Studie zur akuten Toxizität.
5. 6 Subchronische Toxizität (wiederholte Dosen)
6. Standardverfahren für die Anästhesie bei präklinischen Versuchen
6. 1 Planung und Durchführung der Anästhesie.
6. 2 Vorverfahren.
6. 3 Experimenteller Ablauf.
7. Allgemeine Überlegungen und Entnahme von Tierblut.
7. 1 Entnahme von Venenblut.
7. 2 Blutentnahme aus der Schwanzvene.
7. 3 Blutentnahme durch Herzpunktion.
7. 4 Hintere Hohlvene (Vena cava posterior).
7. 5 Sinus orbitalis.
8. Tierversuche zum Herz-Kreislauf-System
8. 1 Ableitung von Elektrokardiogramm (EKG) und Blutdruck (BP).
8. 2 Induktion einer myokardialen Ischämie.
9.Tierversuche zur Colitis ulcerosa
9. 1 Colitis ulcerosa induziert durch 2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsäure (TNBS)
9. 2 Chronische Colitis ulcerosa, ausgelöst durch Dextran-Natriumsulfat (SSD) 2%.
9. 3 Colitis mit Rezidiv (chronisch)
10.Experimente zu antibakteriellen Aktivitäten
10. 1 Antibakterielle Aktivität durch in vitro Assays.
10. 2 Tierversuche zur antibakteriellen Aktivität.
11.Experimente zur antimykotischen Aktivität
11. 1 Agarscheiben-Diffusionsmethode.
11. 2 Minimale Hemmstoffkonzentration (MIC)
11. 3 Sorbital-Test.
11. 4 Neurospora crassa-Test.
11. 5 Wirkung von Ergosterol auf die MIC.
11. 6 Test der Β.
1,3-D-Glucan-Synthase (GS)
11. 7.