
Experiments in Bacterial Genetics: A Laboratory Manual
Bakterien sind leistungsfähige Systeme für die Genforschung. Sie wachsen schnell und sind leicht zu vermehren und zu pflegen, und es wurden zahlreiche Instrumente für ihre Genomanalyse und genetische Manipulation entwickelt. Das Studium von Bakterien und ihren Viren ermöglichte die Entschlüsselung des genetischen Codes und hat unser Verständnis grundlegender biologischer Prozesse wie der DNA-Replikation, Transkription und Translation geprägt.
Dieses Handbuch bietet eine Sammlung von experimentellen Verfahren für die genetische Forschung an Bakterien. Es beschreibt grundlegende Methoden für die Isolierung und Vermehrung von Bakterien und Phagen, die Aufreinigung genomischer DNA und Plasmide sowie die Einführung von DNA in Bakterien. Es werden verschiedene Strategien zur Erzeugung und Bestätigung von Mutationen und zur Schaffung von Gendeletionen und Genfusionen beschrieben, wobei Allelaustausch, zufällige Transposition, Rekombination und CRISPR-Cas-Technologien verwendet werden. Es werden Protokolle für die bakterielle Genomsequenzierung und Resequenzierung sowie für das Mutantenscreening im Hochdurchsatz mittels Transposonsequenzierung vorgestellt.
Obwohl für einige der Protokolle spezifische Bakterienarten wie Escherichia coli, Salmonella enterica, Vibrio cholerae und Staphylococcus aureus verwendet werden, lassen sich die hier beschriebenen Methoden ohne weiteres auf andere Bakterien übertragen. Dieses Handbuch stellt somit eine wertvolle Ressource für diejenigen dar, die genetische Experimente mit Bakterien durchführen wollen.