
Expressed Protein Ligation: Methods and Protocols
Dieses Buch bietet einen umfassenden Überblick über die Expressed Protein Ligation (EPL) und beschreibt Methoden und Protokolle zur Erzeugung ortsspezifisch veränderter Proteine. Die Kapitel enthalten einen Überblick über den Bereich der Semi-Proteinsynthese sowie über verwandte Bereiche, die zur Entwicklung der EPL beigetragen haben, wie z.
B. Proteinspleißen und Peptidsynthese. Nach den einleitenden Kapiteln führt der Rest des Buches den Leser durch Protokolle zur Durchführung von EPL-Reaktionen, Methoden zur Synthese von Peptidthioestern und zur Durchführung von Peptid- und Proteinligationen, Markierung von Proteinen in lebenden Zellen, Protokolle für die Semisynthese von phorphorylierten, glykosylierten und ubiquitylierten Proteinen, Synthese und Zusammenbau assymetrisch modifizierter Nukleosomen, Verwendung von Ligationshilfsmitteln und Synthese zyklischer Proteine sowie neuartige Desulfurierungsstrategien und Verwendung eines selektiven Cys-Seitenkettenschutzes, um präzise modifizierte Proteine zu erhalten.
Die Kapitel sind im Format der erfolgreichen Reihe Methods in MolecularBiology geschrieben und enthalten Einführungen in die jeweiligen Themen, Listen der benötigten Materialien und Reagenzien, schrittweise, leicht reproduzierbare Laborprotokolle sowie Tipps zur Fehlersuche und Vermeidung bekannter Fallstricke. Das Buch Expressed Protein Ligation ist maßgebend und auf dem neuesten Stand: Methods and Protocols eine erfolgreiche Implementierung von Protein-Semi-Synthese-Methoden zur weiteren Erforschung der Struktur und Funktion von Proteinen.