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Subcellular Fractionation: A Laboratory Manual
Eukaryontische Zellen sind bemerkenswert komplexe Strukturen, die ein riesiges Repertoire an Makromolekülen, Organellen und anderen Kompartimenten enthalten, die die für das Leben erforderlichen Aufgaben übernehmen. Für eingehende Untersuchungen ihrer Funktion und Zusammensetzung sind oft zuverlässige Methoden zur Isolierung spezifischer subzellulärer Strukturen erforderlich.
Dieses Laborhandbuch enthält Schritt-für-Schritt-Protokolle für die Extraktion subzellulärer Komponenten aus tierischen Geweben, Hefen, Pflanzen und kultivierten Zellen. Jedes Kapitel konzentriert sich auf eine bestimmte eukaryotische Organelle, ein Vesikel, eine Membran oder einen makromolekularen Komplex. Es werden Strategien zum Aufbrechen von Zellen unter Beibehaltung der strukturellen und funktionellen Integrität der gewünschten Komponente, zur Anreicherung dieser Komponente auf der Grundlage ihrer physikalischen und biochemischen Eigenschaften sowie zur Überwachung und Sicherstellung des Erfolgs des Reinigungsverfahrens vorgestellt.
Die Autoren beschreiben sowohl traditionelle Ansätze (z. B. Dichtegradientenzentrifugation) als auch innovative Techniken (z. B. die Verwendung von SPIONs) zur Isolierung subzellulärer Bestandteile. Dieses Handbuch ist daher eine unverzichtbare Laborressource für alle Zellbiologen, die eine umfassende Sammlung zuverlässiger subzellulärer Fraktionierungsmethoden suchen.